期刊简介
本刊由中国免疫学会、上海市免疫学会和上海市免疫学研究所共同主办的免疫学专业期刊，是中国科学引文数据库来源期刊及统计源期刊，是中国自然科学核心期刊，也是基础类医学核心期刊之一。以服务全国为宗旨，主要报道我国免疫学研究成果，旨在促进国内外学术交流，刊载内容有基础免疫学、临床免疫学和免疫学技术等。本刊设有论著、专家述评、中青年学者论坛、综述、学术讨论等栏目。
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首页>现代免疫学杂志
- 杂志名称：现代免疫学杂志
- 主管单位：上海市教育委员会
- 主办单位：上海市免疫学研究所,上海市免疫学会
- 国际刊号：1001-2478
- 国内刊号：31-1899/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：期刊收录：北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 国家图书馆馆藏, 上海图书馆馆藏, 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), CA 化学文摘(美), 维普收录(中), 万方收录(中)
DNA标记杂交技术筛选抗HBs-IFN-α融合蛋白表达载体
韩焕兴；王永奎；尤长宣；叶伟民；罗荣城；孔宪涛
关键词：融合蛋白表达载体, DNA杂交, 人源单克隆抗体, 地高辛标记探针
摘要：为在无抗药性改变,转化细胞无生物指示系统改变的克隆载体中扩大筛选范围,提高筛选阳性率,本文应用地高辛标记DNA检测系统筛选人源单抗片段与干扰素融合蛋白表达质粒(Anti-HBs-IFN-α),取得了理想的效果.纯化制备载体的插入段DNA,用地高辛标记系统进行化学标记,制成标记探针.挑取单克隆菌扩增,以溶菌酶加煮沸法批量制备载体DNA,点样于硝酸纤维膜上并经80℃烤2h,分别用预杂交液和标记探针进行42℃2h、42℃6h的膜预杂交和杂交反应,洗膜后用酶标抗地高辛抗体显色.未带插入片段的抗体表达载体为阴性对照,IFN-α质粒DNA作阳性对照,在40株转化细胞中筛选出7个目的克隆.为进一步核实该法的筛选效率和可靠性,分别用单酶切和双酶切法对筛选出的阳性载体进行鉴定,琼脂糖电泳结果显示,两者的符合率为100%.该系统筛选结果可靠,尤其在克隆载体转化细胞后无抗药改变,无其他筛选特征的载体构建中有一定的优势.
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