期刊简介
本刊由中国免疫学会、上海市免疫学会和上海市免疫学研究所共同主办的免疫学专业期刊，是中国科学引文数据库来源期刊及统计源期刊，是中国自然科学核心期刊，也是基础类医学核心期刊之一。以服务全国为宗旨，主要报道我国免疫学研究成果，旨在促进国内外学术交流，刊载内容有基础免疫学、临床免疫学和免疫学技术等。本刊设有论著、专家述评、中青年学者论坛、综述、学术讨论等栏目。
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首页>现代免疫学杂志
- 杂志名称：现代免疫学杂志
- 主管单位：上海市教育委员会
- 主办单位：上海市免疫学研究所,上海市免疫学会
- 国际刊号：1001-2478
- 国内刊号：31-1899/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：期刊收录：北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 国家图书馆馆藏, 上海图书馆馆藏, 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), CA 化学文摘(美), 维普收录(中), 万方收录(中)
人颗粒酶B基因的克隆、蛋白纯化及表达分析
李秀英；赖延东；夏良平；曾宗渊；张海涛；冯哲玲；李民友；朱振宇
关键词：颗粒酶B, 淋巴细胞, 原核表达, GST融合蛋白
摘要：TIL具有抗肿瘤的活性,其中颗粒酶B在杀伤肿瘤细胞的过程中起了重要的作用.本实验拟扩增GrB全序列,构建GrB的原核表达载体,从而建立其原核表达体系,获得高效表达的重组GrB,纯化蛋白.用淋巴细胞分离液分离肿瘤组织中的淋巴细胞,并抽提RNA,RT-PCR方法获得GrB的全长,并重组到pGEX-4T-1中,用限制性内切酶酶切和DNA测序法进行鉴定,IPTG诱导pGEX-GrB转化的BL21菌,大量纯化表达产物,并通过SDS-PAGE、Western blot分析表达产物,用MTT法体外检测GrB对Hep2细胞的作用.结果:限制性内切酶酶切和DNA测序分析证实成功获得GrB基因片段,GrB准确克隆入pGEX-4T-1,成功的构建pGEX-GrB,经诱导表达出与GST融合的蛋白,经凝血酶酶切后获得与GrB相符的条带,并能与GrB特异性抗体结合.体外实验表明,GrB能抑制Hep2细胞的增殖.成功构建了pGEX-GrB,并成功表达、大量纯化GrB蛋白,其能够抑制Hep2细胞的增殖.
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