期刊简介
本刊由中国免疫学会、上海市免疫学会和上海市免疫学研究所共同主办的免疫学专业期刊，是中国科学引文数据库来源期刊及统计源期刊，是中国自然科学核心期刊，也是基础类医学核心期刊之一。以服务全国为宗旨，主要报道我国免疫学研究成果，旨在促进国内外学术交流，刊载内容有基础免疫学、临床免疫学和免疫学技术等。本刊设有论著、专家述评、中青年学者论坛、综述、学术讨论等栏目。
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首页>现代免疫学杂志
- 杂志名称：现代免疫学杂志
- 主管单位：上海市教育委员会
- 主办单位：上海市免疫学研究所,上海市免疫学会
- 国际刊号：1001-2478
- 国内刊号：31-1899/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：期刊收录：北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 国家图书馆馆藏, 上海图书馆馆藏, 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), CA 化学文摘(美), 维普收录(中), 万方收录(中)
利用PCR筛选噬菌体文库人免疫球蛋白重链Cγ基因的一种新方法
孙剑华；王宏；钱旻；成国祥
关键词：噬菌体基因组文库, PCR, bigCγ基因, 筛选, 同位素
摘要：扩增噬菌体人基因组文库以形成多个亚文库并富集稀有目的克隆.利用人免疫球蛋白Cγ基因启动子、编码区设计的多对探针引物.PCR筛选已扩增的亚文库,获得共阳性亚文库; 利用多条同位素标记的探针筛选上述共阳性亚文库,经相应探针引物PCR鉴定,获得共阳性多克隆噬菌斑; 2 000倍稀释共阳性多克隆噬菌斑稀释液,PCR筛选出阳性单克隆噬菌斑.基因转换到pBSK(+)载体测序,筛到长12 kb的人免疫球蛋白重链Cγ基因,含有启动子、编码外显子、穿膜外显子及polyA序列.与传统的单条探针筛库相比,新策略利用多条探针一次同位素标记,就筛到完整的稀有Cγ基因; 利用PCR在亚文库,多克降噬菌斑稀释液、单克隆噬菌斑稀释液三个层面上筛选,逐步缩减的筛选范围是一次同位素标记筛到完整稀有基因的前提.新策略不仅提高一倍工作效率,降低几倍的耗材,同时为需要长片段基因的功能基因组领域提供筛选捷径.
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