期刊简介

  本刊由中国免疫学会、上海市免疫学会和上海市免疫学研究所共同主办的免疫学专业期刊,是中国科学引文数据库来源期刊及统计源期刊,是中国自然科学核心期刊,也是基础类医学核心期刊之一。以服务全国为宗旨,主要报道我国免疫学研究成果,旨在促进国内外学术交流,刊载内容有基础免疫学、临床免疫学和免疫学技术等。本刊设有论著、专家述评、中青年学者论坛、综述、学术讨论等栏目。

               

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  • 杂志名称:现代免疫学杂志
  • 主管单位:上海市教育委员会
  • 主办单位:上海市免疫学研究所,上海市免疫学会
  • 国际刊号:1001-2478
  • 国内刊号:31-1899/R
  • 出版周期:双月刊
期刊荣誉:期刊收录:北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 国家图书馆馆藏, 上海图书馆馆藏, 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), CA 化学文摘(美), 维普收录(中), 万方收录(中)
现代免疫学杂志2010年第03期

野生型和突变型人白介素13的大肠杆菌表达及活性分析

刘全华;华丽;霍婧;鲍一笑

关键词:人白介素13, pET28a(+), 大肠杆菌, 活性分析
摘要:利用大肠杆菌表达野生型和突变型重组人白介素13(IL-13),以获得具有生物学活性的重组蛋白.采用PCR方法从质粒pET22b-hIL-13上扩增人成熟IL-13的编码序列.用定点突变引物扩增IL-13突变体(IL-13m)编码基因.将IL-13和IL-13m编码基因分别克隆到原核表达载体pET28a(+)中,构建质粒pET28a(+)-IL-13和pET28a(+)-IL-13m,然后将质粒转化到E.coli BL21(DE3)中,构建重组体,IPTG诱导重组蛋白表达.重组蛋白采用镍柱(Ni-NTA)纯化,纯化后复性,并分析其生物学活性.结果成功得到IL-13和IL-13m重组蛋白,经SDS-PAGE分析.在相对分子质量约14.6 kD的位置出现明显蛋白条带,经Western blot证实为重组hIL-13蛋白;重组蛋白主要以包涵体形式存在.纯化复性后,重组蛋白具有生物学活性.后成功获得了具有生物学活性的野生型和突变型重组人IL-13,为后续研究奠定了基础.